| 別稱
TGF-β
| TGF-β 簡介
轉(zhuǎn)化生長因子β(TGF-β)是一種多功能的細(xì)胞因子,屬于轉(zhuǎn)化生長因子超家 族,TGFB 蛋白由所有白血球系產(chǎn)生。被激活的 TGF-β與其他因子復(fù)合形成 絲氨酸/蘇氨酸激酶復(fù)合物,與 TGF-β受體結(jié)合。TGF-β受體由 1 型和 2 型受體亞單位組成。TGF-β結(jié)合后,2 型受體激酶磷酸化并激活 1 型受體激酶, 從而激活一個(gè)信號(hào)級(jí)聯(lián)。這導(dǎo)致不同的下游底物和調(diào)節(jié)蛋白的激活,誘導(dǎo)不 同靶基因的轉(zhuǎn)錄,在分化、趨化、增殖和許多免疫細(xì)胞的激活中發(fā)揮作用。 TGF-β由包括巨噬細(xì)胞在內(nèi)的許多細(xì)胞類型分泌,呈潛伏狀態(tài),與另外兩種 多肽--潛伏的 TGF-β結(jié)合蛋白(LTBP)和潛伏的相關(guān)肽(LAP)復(fù)合。血清 蛋白酶如漿蛋白酶催化活性 TGF-β從復(fù)合物中釋放。這通常發(fā)生在巨噬細(xì)胞 的表面,潛伏的 TGF-β復(fù)合物通過其配體血栓軟骨素-1(TSP-1)與 CD36 結(jié)合。激活巨噬細(xì)胞的炎癥刺激物通過促進(jìn)血漿蛋白的激活而增強(qiáng)活性 TGF- β的釋放。巨噬細(xì)胞還可以內(nèi)吞由漿細(xì)胞分泌的 IgG 結(jié)合的潛伏 TGF-β復(fù)合 物,然后將活性 TGF-β釋放到細(xì)胞外液中。其主要功能之一是調(diào)節(jié)炎癥過程, 特別是在腸道。TGF-β還在干細(xì)胞分化以及 T 細(xì)胞調(diào)節(jié)和分化中發(fā)揮關(guān)鍵作 用。由于其在免疫和干細(xì)胞調(diào)節(jié)和分化中的作用,它是癌癥、自身免疫性疾 病和傳染病領(lǐng)域中研究較多的一種細(xì)胞因子。TGF-β超家族包括內(nèi)源性生長 抑制蛋白;TGF-β表達(dá)的增加往往與許多癌癥的惡性程度和細(xì)胞對(duì) TGF-β的 生長抑制反應(yīng)的缺陷相關(guān)。其免疫抑制功能的失調(diào)也與自身免疫性疾病的發(fā) 病機(jī)制有關(guān),盡管其作用是由存在的其他細(xì)胞因子的環(huán)境介導(dǎo)的。
| 特異性
可檢測樣本中大鼠的TGF-β,且與其類似物無明顯交叉反應(yīng)。
| 典型數(shù)據(jù)及參考曲線
由于實(shí)驗(yàn)操作條件的不同( 如操作者、移液技術(shù)、洗板技術(shù)和穩(wěn)定條件等),標(biāo)準(zhǔn)曲線的OD值會(huì)有所差異。以下數(shù)據(jù)和曲線僅供參考,實(shí)驗(yàn)者需根據(jù)自己的實(shí)驗(yàn)建立標(biāo)準(zhǔn)曲線。
| 濃度(pg/mL) |
2000 |
1000 |
500 |
250 |
125 |
62.5 |
31.25 |
|
| OD值 |
2.22 |
1.56 |
0.92 |
0.63 |
0.42 |
0.25 |
0.18 |
0.08 |
| 校正OD值 |
2.14 |
1.48 |
0.94 |
0.55 |
0.34 |
0.17 |
0.1 |
- |
| 重復(fù)性
板內(nèi)變異系數(shù)小于10%,板間變異系數(shù)小于10%
| 回收率
在選取的健康大鼠血清、血漿和細(xì)胞培養(yǎng)上清中加入3個(gè)不同濃度水平的大鼠TGF-β,計(jì)算回收率
| 樣本類型 |
范圍 |
平均回收率 |
| 血清(n=8) |
84-101 |
96 |
| 血漿(n=8) |
92-105 |
102 |
| 細(xì)胞培養(yǎng)上清(n=8) |
96-108 |
105 |
| 線性稀釋
分別在選取的4份健康大鼠血清、血漿和細(xì)胞培養(yǎng)上清中加入高濃度大鼠TGF-β,在標(biāo)準(zhǔn)曲線動(dòng)力學(xué)范圍內(nèi)進(jìn)行稀釋,評(píng)估線性。
| 稀釋比例 |
回收率(%) |
血清 |
血漿 |
細(xì)胞培養(yǎng)上清 |
| 1:2 |
范圍(%) |
84-95 |
88-96 |
90-110 |
| 平均回收率(%) |
91 |
93 |
96 |
| 1:4 |
范圍(%) |
89-103 |
87-108 |
105-115 |
| 平均回收率(%) |
94 |
98 |
108 |
注:ELISA試劑盒檢測范圍等數(shù)據(jù),因檢測樣本 的不同而調(diào)整,實(shí)際數(shù)據(jù)以隨貨說明書為準(zhǔn)。
